Name:Isopropyl-β-D-1-Thiogalactopyranoside
Alias:IPTG
CAS:367-93-1
產品純度: IPTG ≥98.0% ，
產品性狀: 白色或類白色粉末,溶于水后呈清亮無色液體
分 子 式: C9H18O5S
分 子 量: 238.30
保存溫度: 2-8°C冷藏保存 ,配制好后保存于-20°C，室溫可放置一個月。
主要作用：異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)是一種作用極強的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩(wěn)定,因此被實驗室廣泛應用
IPTG是β–半乳糖苷酶的活性誘導物質?；谶@個特性，當pUC系列的載體DNA（或其他帶有l(wèi)acZ 基因載體DNA）以lacZ 缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉染時，如果在平板培養(yǎng)基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互補性，可以根據是否呈現白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑選出基因重組體。此外，它還可以作為具有l(wèi)ac或tac等啟動子的表達載體的表達誘導物使用。
誘導原理： E.coli的乳糖操縱子（元）含Z、Y及A三個結構基因，分別編碼半乳糖苷酶、透酶和乙?；D移酶，此外還有一個操縱序列O、一個啟動序列P及一個調節(jié) 基因I（圖15-4）。I基因編碼一種阻遏蛋白，后者與O序列結合，使操縱子（元）受阻遏而處于關閉狀態(tài)。在啟動序列P上游還有一個分解（代謝）物基因激 活蛋白（CAP）結合位點。由P序列、O序列和CAP結合位點共同構成lac操縱子的調控區(qū)，三個酶的編碼基因即由同一調控區(qū)調節(jié)，實現基因產物的協調表 達 。在沒有乳糖存在時，lac操縱子（元）處于阻遏狀態(tài)。此時，I序列在PI啟動序列操縱下表達的Lac阻遏蛋白與O序列結合，阻礙RNA聚合酶與P序列結 合，抑制轉錄起動。當有乳糖存在時，lac操縱子（元）即可被誘導。在這個操縱子（元）體系中，真正的誘導劑并非乳糖本身。乳糖進入細胞，經b－半乳糖苷 酶催化，轉變?yōu)榘肴樘?。后者作為一種誘導劑分子結合阻遏蛋白，使蛋白構象變化，導致阻遏蛋白與O序列解離、發(fā)生轉錄。異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）是一 種作用極強的誘導劑，不被細菌代謝而十分穩(wěn)定，因此被實驗室廣泛應用。
使用方法： 首先把異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷配制成24 mg/ml（100 mM）的水溶液，并進行過濾除菌后保存。然后在100 ml的瓊脂培養(yǎng)基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培養(yǎng)基。
當DNA片段插入至pUC系列載體（或其他帶有l(wèi)acZ、Amp基因載體），然后轉化至lacZ缺失細胞中后，涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培養(yǎng)基，可根據長出菌體的藍白色，而方便地挑選出基因重組體（白色為具有DNA插入片段的基因重組體）。
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